Чем обусловлена реакция осаждения белков солями тяжелых металлов
Презентация-лабораторная работа «Действие солей тяжелых металлов на белки»
Онлайн-конференция
«Современная профориентация педагогов
и родителей, перспективы рынка труда
и особенности личности подростка»
Свидетельство и скидка на обучение каждому участнику
Выбранный для просмотра документ Л.р-Действие солей тяжелых МЕ на белки.ppt
Описание презентации по отдельным слайдам:
Теоретические сведения: Белки при взаимодействии с солями свинца, меди, ртути, серебра и других тяжелых металлов денатурируются и выпадают в осадок Однако при избытке некоторых солей наблюдается растворение первоначально образовавшегося осадка. Это связано с накоплением ионов металла на поверхности денатурированного белка и появлением положительного заряда на белковой молекуле Способность молекул белка прочно связывать ионы тяжелых металлов с образованием нерастворимых в воде осадков используется как противоядие при отравлении солями ртути, меди, свинца и другими металлами
Ход работы: I. Действие CuSO4 на белки: + р-р CuSO4 Помутнение, выпадение голубого осадка Пробирка с раствором белка Осадок растворяется в избытке соли
II. Действие AgNO3 на белки + р-р AgNO3 Помутнение – выпадение беловатого осадка Пробирка с раствором белка Осадок не растворяется в избытке р-ра (отличие от других солей тяжелых металлов)
Вывод: воздействие солей тяжелых металлов, содержащихся в воде и пищевых продуктах.
Курс повышения квалификации
Дистанционное обучение как современный формат преподавания
Курс профессиональной переподготовки
Методическая работа в онлайн-образовании
Курс повышения квалификации
Современные педтехнологии в деятельности учителя
Ищем педагогов в команду «Инфоурок»
Номер материала: ДБ-234330
Не нашли то что искали?
Вам будут интересны эти курсы:
Оставьте свой комментарий
Авторизуйтесь, чтобы задавать вопросы.
Трехлетнюю олимпиаду среди школ запустят в России в 2022 году
Время чтения: 1 минута
В школах Тюмени запустят раздельный сбор отходов
Время чтения: 1 минута
Госдума приняла закон об использовании онлайн-ресурсов в школах
Время чтения: 2 минуты
Учителям предлагают 1,5 миллиона рублей за переезд в Златоуст
Время чтения: 1 минута
Путин поручил не считать выплаты за классное руководство в средней зарплате
Время чтения: 1 минута
Во Франции планируют ввести уголовное наказание за буллинг в школе
Время чтения: 1 минута
Подарочные сертификаты
Ответственность за разрешение любых спорных моментов, касающихся самих материалов и их содержания, берут на себя пользователи, разместившие материал на сайте. Однако администрация сайта готова оказать всяческую поддержку в решении любых вопросов, связанных с работой и содержанием сайта. Если Вы заметили, что на данном сайте незаконно используются материалы, сообщите об этом администрации сайта через форму обратной связи.
Все материалы, размещенные на сайте, созданы авторами сайта либо размещены пользователями сайта и представлены на сайте исключительно для ознакомления. Авторские права на материалы принадлежат их законным авторам. Частичное или полное копирование материалов сайта без письменного разрешения администрации сайта запрещено! Мнение администрации может не совпадать с точкой зрения авторов.
Осаждение белков солями тяжелых металлов
Существуют определенные границы концентраций солей тяжелых металлов, при которых комплекс белка с солью тяжелого металла переходит в осадок либо находится в растворимом состоянии.
Ход работы. К 2 мл раствора яичного альбумина добавляют 5 капель 1 %-ного раствора сульфата меди. Выпадает осадок, который растворяется в избытке (7-10 мл) раствора этой соли.
Результаты наблюдений заносят в таблицу 5.
| Исследуемый материал | Денатурирующий фактор и его воздействие | Наблюдения |
Материалы и реактивы: раствор яичного альбумина (см. приложение Б, п.4); 1 %, 10 %-ный раствор уксусной кислоты; 10 %-ный раствор NаОН; 96 %-ный этиловый спирт; 80 %-ный ацетон; концентрированные кислоты Н2SO4, НСl, НNО3; 1 %-ный раствор сульфата меди; 10 %-ный раствор ТХУ; насыщенный раствор NаСI.
Оборудование: пробирки обыкновенные; пипетки на 1–2 мл; спиртовка.
Контрольные вопросы
1.Что такое денатурация белка?
2. Какие Вы знаете денатурирующие факторы и каков механизм их действия?
3. Какие структуры белковых молекул изменяются при денатурации?
4. Является ли денатурация обратимым процессом?
Разделение и очистка белков методом диализа
Диализом называется процесс разделения высокомолекулярных и низкомолекулярных веществ с помощью полупронецаемых мембран. Белковые молекулы, обладая большой молекулярной массой, не способны проникать через полупронецаемые перегородки (искусственные и естественные мембраны). При этом низкомолекулярные частицы (органические и неорганические) легко проходят через поры полупроницаемых мембран.
Диализ широко используется для очистки белков от низкомолекулярных примесей (соли, сахара и других), которые легко проходят через поры полупроницаемых мембран. Прибор, в котором проводят диализ, называется диализатором. Целлофановый или коллодиевый мешочек, опущенный в сосуд с водой, представляет простейший диализатор (рис.1). Белок, помещенный в мешочек, остается в нем, а низкомолекулярные вещества диффундируют через мембрану в воду.
 |
Белок
(NН4)2SО4
 | ||
 | | |
 |  | |
 | | |
Н2О
 |
Рисунок 1- Схема диализатора
Методом диализа можно разделить альбумины и глобулины. При переходе солей из белкового раствора в окружающую среду глобулины будут выпадать в осадок, т.к. они не растворимы в водной среде, а альбумины будут оставаться в растворе.
Простейшим диализатором может служить целлофановый мешочек, опущенный в стакан с водой. Солевой раствор белка помещают в мешочек, при этом молекулы низкомолекулярных веществ (ионы соли) диффундируют через стенку мешочка, а крупные молекулы белка остаются внутри мешочка.
Глобулиновую природу белков осадка доказывают растворением его в растворах солей (10 %-ный раствор хлористого аммония, хлористого натрия и др.) При разбавлении раствора водой вновь выпадает осадок.
Альбуминовую природу белков фильтрата подтверждают разбавлением водой с отсутствием осадка или полным насыщением сернокислым аммонием (выпадает осадок).
Материалы и реактивы: раствор яичного белка, содержащего альбумины, глобулины и сульфат аммония (см. приложение Б, п.5); 10 %-ный раствор хлористого бария; 10 %-ный раствор едкого натра; 1%-ный раствор медного купороса; 10 %-ный раствор хлористого аммония; сернокислый аммоний, тонко измельченный.
Оборудование:пробирки обыкновенные; целлофановый или коллодиевый мешочек; химический стакан или сосуд на 1–2 мл; пипетки мерные на 10 мл; пипетки.
Контрольные вопросы
1. Принцип процесса диализа.
2. Устройство простейшего диализатора.
3. Для каких целей применяется диализ?
4. Почему методом диализа можно отделить глобулины (солерастворимые белки) от глобулинов (водорастворимые белки)?
5. Как доказать глобулиновую и альбуминовую природу белков при их разделении?
6. Реакции, используемые для доказательства протекания процесса диализа.
6 Методы определения азота в биологических объектах
Общие условия выбора системы дренажа: Система дренажа выбирается в зависимости от характера защищаемого.
Механическое удерживание земляных масс: Механическое удерживание земляных масс на склоне обеспечивают контрфорсными сооружениями различных конструкций.
Осаждение белков солями тяжелых металлов
Белки при взаимодействии с солями тяжелых металлов (медь, ртуть, свинец и др.) денатурируют и образуют нерастворимые в воде комплексные соединения вследствие адсорбции тяжелого металла на поверхности белковой молекулы. На этой способности белков основано использование их в качестве противоядия при отравлении тяжелыми металлами.
В две пробирки наливают по 0,5 мл раствора белка. В первую добавляют 2 капли 5% раствора сульфата меди, во вторую – 2 капли 5% раствора ацетата свинца.
Осаждение белков концентрированными минеральными кислотами.
Выпадение белка в осадок при взаимодействии с концентрированными минеральными кислотами обусловлено дегидратацией белковых молекул, образованием нерастворимых комплексных солей белка и кислот и др. В избытке серной и соляной кислот происходит растворение первоначально выпавших осадков белка. Избыток азотной кислоты не растворяет осажденный белок. Реакция с азотной кислотой используется при клинических исследованиях мочи на присутствие в ней белка (проба Геллера).
В пробирку наливают 1 мл концентрированной азотной кислоты и затем, наклонив пробирку, осторожно приливают по стенке равный объем раствора белка. Встряхивают пробирку и добавляют избыток азотной кислоты. Повторяют опыт с концентрированными соляной и серной кислотами.
Осаждение белков органическими кислотами.
Реакции необратимого осаждения белков
При необратимом осаждении происходит глубокая денатурация и агрегация белка. Денатурированный белок не способен к восстановлению своих первоначальных физико-химических и биологических свойств. Необратимое осаждение вызывается высокой температурой, действием концентрированных минеральных и некоторых органических кислот, ионов тяжелых металлов, алкалоидных реагентов, детергентов, красителей.
Реактивы: водный раствор яичного белка (раствор готовят, как указано в лабораторной работе №1; концентрированные серная, соляная и азотная кислоты; 5 %-й раствор ацетата свинца; 2,5 %-й раствор нитрата серебра; 5 %-й раствор сульфата меди.
Задание 1. Осаждение белков минеральными кислотами.
Реакция находит применение для быстрого определения белка в биологических жидкостях, например, моче.
Ход работы
Данную работу необходимо выполнять в вытяжном шкафу, соблюдая особую осторожность!
Задание 2. Осаждение белков солями тяжелых металлов.
Белки осаждаются солями меди, свинца, ртути, цинка, серебра и других тяжелых металлов. Свойство белков связывать ионы тяжелых металлов используется в медицине при оказании первой помощи пострадавшим от отравления солями меди, свинца, ртути.
Ход работы
Оформление результатов
Оформите результаты проведенных исследований в виде таблицы.
Чем обусловлена реакция осаждения белков солями тяжелых металлов
Типичный БРГИ №1 запись закреплена
Работа № 2. Осаждение белков при кипячении.
При нагревании почти все белки денатурируют и выпадают в осадок. При этом разрушаются водородные связи, происходит изменение вторичной и третичной структуры белка, белок теряет глобулярную форму и на поверхность молекулы, вместо гидрофильных групп, выходят гидрофобные. В сильнокислых и щелочных средах растворы белков при кипячении не коагулируют и могут дать осадок лишь при добавлении какой-нибудь нейтральной соли (NaCl). В этих случаях устойчивость белка в растворе зависит от приобретения положительного заряда в сильно-кислой среде и отрицательного заряда в щелочной. Наиболее легко белки подвергаются тепловой денатурации в изоэлектрической среде.
Клинико-диагностическое значение. Осаждение белков кипячением используется для качественного обнаружения белка в моче.
Ход работы. В 5 пробирок налить по 0,5 мл сыворотки. В 3-ю пробирку добавить 10 капель 1% раствора уксусной кислоты, для создания кислой среды. В 4-ю пробирку 10 капель 1% раствора уксусной кислоты и 5 капель насыщенного раствора поваренной соли. В 5-ю пробирку добавить 5 капель 10% раствора щелочи.
Все пробирки прокипятить. После кипячения во 2-ю пробирку добавить 1-2 капли 1% раствора уксусной кислоты.
Записать в таблицу результаты осаждения белка при кипячении. Отметить появление осадка плюсом, а отсутствие минусом и указать в каждом случае причины появления или отсутствия осадка белка.
Реакция среды Нейтральная Слабокислая Сильнокислая Сильнокислая с электролитом Щелочная
Результат
Вывод
Работа № 3. Осаждение белков солями тяжелых металлов.
Осаждение белков солями тяжелых металлов происходит при небольших концентрациях этих солей. Белки при взаимодействии с солями тяжелых металлов (свинца, меди, серебра, ртути и др.) адсорбируют их, образуя с ними солеобразные и комплексные соединения, растворимые в избытке солей. Клиническое значение: способность белка прочно связывать ионы тяжелого металла, в виде нерастворимых осадков в воде, позволяет использовать их как противоядие при отравлении солями ртути, меди, свинца и другими тяжелыми металлами.
А) Осаждение белков медным купоросом.
Налить в пробирку 1 мл раствора белка и по каплям добавить 10% раствор CuSO4 до образования осадка, нерастворимого в воде. При добавлении 10% раствора CuSO4 в большом объеме наблюдают растворение осадка в избытке реактива. Растворение осадка в избытке солей называется адсорбционной пептизацией. Данное явление происходит вследствие возникновения одноименного положительного заряда на частицах белка.
Б) Осаждение белков уксуснокислым свинцом.
К 1,0 мл раствора белка добавить 2-5 капель 5% раствора уксуснокислого свинца до образования осадка.
По выполненной работе сделать вывод.
Работа № 4. Осаждение белков органическими кислотами.
Некоторые органические кислоты вызывают необратимые осаждение белков. Клинико-диагностическое значение: сульфосалициловая кислота используются для обнаружения малых количеств белка в биологических жидкостях (спино-мозговой жидкости, моче, экссудатах). Трихлоруксусная кислота используется для получения безбелкового фильтрата крови в лабораторной практике.
Ход работы. К 0,5-1,0 мл раствора белка добавить равный объем 10% раствора сульфасалициловой кислоты или 5% раствора трихлоруксусной кислоты. Отметить выпадение белого осадка.
Работа № 5. Осаждение белков концентрированной азотной кислотой (проба Геллера).
Выпадение белка в осадок при действии некоторых минеральных кислот связано с дегидратацией белковых частиц и образованием комплексных солей белка с кислотами. Клинико-диагностическое значение: в избытке всех минеральных кислот, за исключением азотной, выпавший осадок белка растворяется. Поэтому реакция осаждения белков азотной кислотой используется для качественного, а также для количественного (см. ниже) анализа мочи (проба Геллера).
Ход работы. К 1 мл концентрированной азотной кислоты осторожно по стенке пробирки, наклонив ее под углом 450 так, чтобы обе жидкости сразу не смешивались, наслоить равный объем раствора белка.
На границе двух жидкостей образуется осадок в виде белого кольца.
По работе сделать вывод.