Что значит окраска на слизь по крейбергу
Что значит окраска на слизь по крейбергу
ГБОУ ВПО «Красноярский государственный медицинский университет им. проф. В.Ф. Войно-Ясенецкого» МЗ РФ, г. Красноярск
Арутюнян Вильям Рузвелдович ― заочный аспирант кафедры и клиники хирургических болезней им. проф. А.М. Дыхно с курсом эндоскопии и эндохирургии ПО ГБОУ ВПО «Красноярский государственный медицинский университет им. проф. В.Ф. Войно-Ясенецкого»
660130, г. Красноярск, ул. Гусарова, д. 62, кв. 11, тел. +7-913-512-73-50, e-mail: Этот адрес электронной почты защищён от спам-ботов. У вас должен быть включен JavaScript для просмотра.
Реферат. Проведен комплексный клинико-лабораторный, патоморфологический и морфометрический анализ результатов влияния интраоперационного лаважа просвета толстой кишки на ее стенку у экспериментальных животных с декомпенсированной обтурационной толстокишечной непроходимостью.
Ключевые слова: экспериментальная острая толстокишечная непроходимость, лаваж толстой кишки, первичный межкишечный анастомоз толстой кишки.
Актуальность
Острая толстокишечная непроходимость (ОТКН) остается одним из наиболее тяжелых осложнений целого ряда заболеваний прямой и ободочной кишки, составляя до 80% всех ургентных состояний с вовлечением толстой кишки [4, 6]. Летальность при этой нозологии в условиях экстренной хирургии достигает 7-50% 1. Высок процент пациентов, которым на первом этапе хирургического лечения накладывается колостома (40-72%) 7. Одномоментные радикальные операции на толстой кишке в условиях ОТКН с восстановлением ее просвета составляют незначительное количество. Разработка новых технологий, позволяющих избежать наложения колостом при первичных операциях на толстой кишке, в ургентной хирургии является сложной задачей. Важным моментом в проблеме является оценка состояния стенки толстой кишки в условиях развития ОТКН и лаважа ее просвета.
Цель исследования ― изучить патоморфологические изменения в стенке толстой кишки и провести их морфометрический анализ в динамике развития экспериментальной толстокишечной непроходимости и в условиях ее внутрипросветного лаважа растворами разной осмотической активности.
Материалы и методы
В эксперименте на кроликах создавалась модель ОТКН. В контрольные сроки после моделирования (24, 48, 72 часа) проводили забор толстой кишки для оценки ее морфологического состояния, определялся микробный пейзаж в ее содержимом. В исследуемых группах животных интраоперационно проводили лаваж толстой кишки стерильными солевыми растворами заданной осмолярности (от 300 до 540 мосм/л). Оценивали реакцию стенки толстой кишки на ее декомпрессию в комбинации с лаважом (непосредственный эффект).
У всех животных с моделью ОТКН в установленные сроки проводился забор материала ― толстая кишка, для морфологического исследования с окраской гематоксилин-эозином и окраской по Крейбергу на слизь. Для детализации морфологических данных у контрольных животных и во всех сериях эксперимента изучалась морфометрическая характеристика толстой кишки в динамике эксперимента. Оценивались такие параметры, как толщина слизистой оболочки, толщина всех слоев стенки кишки и соотношение ее с толщиной слизистой оболочкой, степень отека слизистой оболочки в баллах и численная плотность инфильтрации слизистой оболочки.
Дополнительно содержимое толстой кишки брали для бактериологического исследования. У кроликов исследуемых групп, после ликвидации ОТКН, просвет толстой кишки промывали стерильными полиионными растворами с фиксированной осмолярностью в объеме 250 мл на 1 кг массы. В исходных и заключительных (после промывания) порциях кишечного содержимого определялось количество и качество микрофлоры. Для бактериологического исследования содержимое толстой кишки брали: 1 ― у здоровых животных в стерильную емкость (до моделирования ОТКН) из прямой кишки (трансанально); 2 ― после моделирования ОТКН через 24 и 48 часов (при декомпрессии толстой кишки ― из первой порции толстокишечного содержимого); 3 ― после моделирования и устранения непроходимости (при проведении санации просвета толстой кишки растворами разной осмотической активности из расчета 250,0 мл раствора на 1 кг массы животного в течение 30 минут до прозрачных промывных вод ― из последней порции отработанного раствора). Материал в бактериологическую лабораторию доставлялся в течение двух часов. В бактериологической лаборатории с культур, выросших на средах, делались мазки со всех колоний и окрашивались по Грамму, затем исследовались в световом микроскопе.
Статистическая обработка данных проводилась с указанием числа наблюдений с расчетом средних величин (М), определением среднеквадратического отклонения (b), средней ошибки (m). Вычислялся критерий Стьюдента (t). При проведении межгруппового сравнительного анализа использовалась методика Фишера.
Анализ полученных результатов
При гистологическом исследовании стенки толстой кишки после моделирования 24 часовой ОТКН в собственной пластинке слизистой оболочки отмечали: слабо выраженный отек, умеренную и равномерную воспалительную клеточную инфильтрацию нейтрофилами, с примесью плазматических клеток и лимфоцитов при окраске гематоксилин-эозином, а при окраске по Крейбергу на слизь ― выявлялось резко положительное окрашивание апикальных концов эпителиоцитов. При этом со стороны поверхностных отделов эпителиального покрова положительно окрашивались лишь единичные клетки. Сосуды слизистой оболочки кишки были полнокровными, с явлениями краевого стояния сегментоядерных лейкоцитов. Сосуды микроциркуляторного русла подслизистого, мышечного и серозного слоев были с умеренным кровенаполнением, явлениями стаза эритроцитов. Подслизистая оболочка была умеренно отечная, слабо и равномерно инфильтрирована сегментоядерными лейкоцитами и плазматическими клетками (рис. 1).
В мышечной оболочке кишки миоциты были расположены достаточно компактно, с типичным формированием двух слоев ― поперечного и продольного. В серозной оболочке отмечали признаки умеренно выраженного отека.
Через 48 часов с момента моделирования ОТКН, в слизистой оболочке отмечали выраженный отек внеклеточного матрикса наряду с выраженной диффузной инфильтрацией сегментоядерными лейкоцитами, лимфоцитами и плазматическими клетками. При окраске на слизь отмечалось неравномерное окрашивание эпителиоцитов крипт и слабое окрашивание эпителиоцитов поверхностного эпителия. Подслизистая оболочка была с выраженным воспалительным отеком, слабо и неравномерно инфильтрирована сегментоядерными лейкоцитами и плазматическими клетками. Кровеносные сосуды всех оболочек кишки были с признаками умеренного кровенаполнения. Определялся выраженный отек серозной оболочки (рис. 2).
Через 72 часа после моделирования ОТКН в слизистой оболочке отмечался выраженный отек внеклеточного матрикса, наряду со значительно выраженной диффузной инфильтрацией сегментоядерными лейкоцитами, лимфоцитами и плазматическими клетками, с формированием микроабсцессов (рис. 3). При окраске на слизь отмечается неравномерное и малочисленное окрашивание эпителиоцитов крипт в поверхностных слоях эпителиальной выстилки. Подслизистая оболочка была с признаками выраженного воспалительного отека, со слабо выраженной диффузной инфильтрацией сегментоядерными лейкоцитами и плазматическими клетками. Миоциты располагались достаточно компактно, с четкими границами между поперечным и продольным слоями, однако определялся выраженный отек внеклеточного матрикса мышечной оболочки. Кровеносные сосуды всех оболочек были с морфологической картиной выраженного полнокровия, с явлениями стаза эритроцитов и тромбоза отдельных сосудов микроциркуляторного русла. В серозной оболочке наблюдалась картина выраженного отека.
Динамика морфометрических параметров толстой кишки отражена в таблице 1.
Изменения морфометрических показателей в динамике эксперимента (табл. 1) указывают на значительное увеличение степени выраженности воспалительного отека слизистой оболочки толстой кишки, увеличение численной плотности воспалительного клеточного инфильтрата, и, как следствие ― увеличение общей толщины стенки толстой кишки. Показатели таблицы 1, также статистически достоверно отражают прогрессирующее нарастание воспалительной клеточной реакции в стенке толстой кишки в зависимости от увеличения длительности ОТКН.
При сроках эксперимента 48 и 72 часа после создания обтурационной толстокишечной непроходимости, общее значение плотности воспалительного клеточного инфильтрата в слизистой оболочке достоверно возрастало в несколько раз: от 40±13,2 (в контроле) до 1021,0±197,2 и 1126,1±209,6 (соответственно 48 и 72 часовой ОТКН: P Опубликовано в Экспериментальная онкология
Общий анализ мокроты
Мокрота – отделяемый из легких и дыхательных путей (трахеи и бронхов) патологический секрет. Общий анализ мокроты – лабораторное исследование, которое позволяет оценить характер, общие свойства и микроскопические особенности мокроты и дает представление о патологическом процессе в дыхательных органах.
Для чего используется этот анализ?
Когда назначается анализ?
Клинический анализ мокроты.
Мг/дл (миллиграмм на децилитр),
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Как правильно подготовиться к исследованию?
Рекомендуется употребить большой объем жидкости (воды) за 8-12 часов до сбора мокроты.
Общая информация об исследовании
Мокрота – это патологический секрет легких и дыхательных путей (бронхов, трахеи, гортани), который отделяется при откашливании. У здоровых людей мокрота не выделяется. В норме железы крупных бронхов и трахеи постоянно образовывают секрет в количестве до 100 мл/сут., который проглатывается при выделении. Трахеобронхиальный секрет представляет собой слизь, в состав которой входят гликопротеины, иммуноглобулины, бактерицидные белки, клеточные элементы (макрофаги, лимфоциты, слущенные клетки эпителия бронхов) и некоторые другие вещества. Данный секрет обладает бактерицидным эффектом, способствует выведению вдыхаемых мелких частиц и очищению бронхов. При заболеваниях трахеи, бронхов и легких усиливается образование слизи, которая отхаркивается в виде мокроты. У курильщиков без признаков заболеваний органов дыхания также обильно выделяется мокрота.
Клинический анализ мокроты является лабораторным исследованием, которое позволяет оценить характер, общие свойства и микроскопические особенности мокроты. На основании данного анализа судят о воспалительном процессе в органах дыхания, а в некоторых случаях ставят диагноз.
При клиническом исследовании мокроты анализируются такие показатели, как количество мокроты, её цвет, запах, характер, консистенция, наличие примесей, клеточный состав, количество волокон, определяется присутствие микроорганизмов (бактерий, грибов), а также паразитов.
Мокрота по составу неоднородна. Она может содержать слизь, гной, серозную жидкость, кровь, фибрин, причем одновременное присутствие всех этих элементов не обязательно. Гной образуют скопления лейкоцитов, возникающие в месте воспалительного процесса. Воспалительный экссудат выделяется в виде серозной жидкости. Кровь в мокроте появляется при изменениях стенок легочных капилляров или повреждениях сосудов. Состав и связанные с ним свойства мокроты зависят от характера патологического процесса в органах дыхания.
Микроскопический анализ дает возможность под многократным увеличением рассмотреть присутствие различных форменных элементов в мокроте. Если микроскопическое исследование не выявило наличия патогенных микроорганизмов, это не исключает присутствия инфекции. Поэтому при подозрении на бактериальную инфекцию одновременно рекомендуется выполнять бактериологическое исследование мокроты с определением чувствительности возбудителей к антибиотикам.
Материал для анализа собирается в стерильный одноразовый контейнер. Пациенту необходимо помнить, что для исследования нужна мокрота, выделенная при откашливании, а не слюна и слизь из носоглотки. Собирать мокроту нужно утром до приема пищи, после тщательного полоскания рта и горла, чистки зубов.
Результаты анализа должны оцениваться врачом в комплексе с учётом клиники заболевания, данных осмотра и результатов других лабораторных и инструментальных методов исследования.
Для чего используется исследование?
Когда назначается исследование?
Что означают результаты?
Количество мокроты при разных патологических процессах может составлять от нескольких миллилитров до двух литров в сутки.
Незначительное количество мокроты отделяется при…
Большое количество мокроты может выделяться при…
По изменению количества мокроты иногда можно оценить динамику воспалительного процесса.
Цвет мокроты
Чаще мокрота бесцветная.
Зеленый оттенок может свидетельствовать о присоединении гнойного воспаления.
Различные оттенки красного указывают на примесь свежей крови, а ржавый – на следы распада эритроцитов.
Ярко-желтая мокрота наблюдается при скоплении большого количества эозинофилов (например, при бронхиальной астме).
Черноватая или сероватая мокрота содержит угольную пыль и наблюдается при пневмокониозах и у курильщиков.
Мокроту могут окрашивать и некоторые лекарственные средства (например, рифампицин).
Запах
Мокрота обычно не имеет запаха.
Гнилостный запах отмечается в результате присоединения гнилостной инфекции (например, при абсцессе, гангрене легкого, при гнилостном бронхите, бронхоэктатической болезни, раке легкого, осложнившемся некрозом).
Своеобразный «фруктовый» запах мокроты характерен для вскрывшейся эхинококковой кисты.
Характер мокроты
Слизистая мокрота наблюдается при катаральном воспалении в дыхательных путях, например, на фоне острого и хронического бронхита, трахеита.
Серозная мокрота определяется при отеке легких вследствие выхода плазмы в просвет альвеол.
Слизисто-гнойная мокрота наблюдается при бронхите, пневмонии, бронхоэктатической болезни, туберкулезе.
Гнойная мокрота возможна при гнойном бронхите, абсцессе, актиномикозе легких, гангрене.
Кровянистая мокрота выделяется при инфаркте легких, новообразованиях, травме легкого, актиномикозе и других факторах кровотечения в органах дыхания.
Консистенция мокроты зависит от количества слизи и форменных элементов и может быть жидкой, густой или вязкой.
Плоский эпителий в количестве более 25 клеток указывает на загрязнение материала слюной.
Клетки цилиндрического мерцательного эпителия – клетки слизистой оболочки гортани, трахеи и бронхов; их обнаруживают при бронхитах, трахеитах, бронхиальной астме, злокачественных новообразованиях.
Альвеолярные макрофаги в повышенномколичестве в мокроте выявляют при хронических процессах и на стадии разрешения острых процессов в бронхолегочной системе.
Лейкоциты в большом количестве выявляются при выраженном воспалении, в составе слизисто-гнойной и гнойной мокроте.
Эозинофилы обнаруживаются при бронхиальной астме, эозинофильной пневмонии, глистных поражениях легких, инфаркте легкого.
Эритроциты. Обнаружение в мокроте единичных эритроцитов диагностического значения не имеет. При наличии свежей крови в мокроте выявляются неизмененные эритроциты.
Клетки с признаками атипии присутствуют при злокачественных новообразованиях.
Эластические волокна появляются при распаде ткани легкого, которое сопровождается разрушением эпителиального слоя и освобождением эластических волокон; их обнаруживают при туберкулезе, абсцессе, эхинококкозе, новообразованиях в легких.
Коралловидные волокна выявляют при хронических заболеваниях (например, при кавернозном туберкулезе).
Обызвествленные эластические волокна – эластические волокна, пропитанные солями кальция. Их обнаружение в мокроте характерно для туберкулеза.
Спирали Куршмана образуются при спастическом состоянии бронхов и наличии в них слизи; характерны для бронхиальной астмы, бронхитов, опухолей легких.
Кристаллы Шарко – Лейдена – продукты распада эозинофилов. Характерны для бронхиальной астмы, эозинофильных инфильтратов в легких, легочной двуустки.
Мицелий грибов появляется при грибковых поражениях бронхолегочной системы (например, при аспергиллезе легких).
Прочая флора. Обнаружение бактерий (кокков, бацилл), особенно в больших количествах, указывает на наличие бактериальной инфекции.
Что может влиять на результат?
Результаты анализа будут недостоверными при:
Прием антибактериальных, противогрибковых или противогельминтных препаратов, влияющих на возбудителей инфекционного процесса в легких, изменяет характер мокроты.
Кто назначает исследование?
Пульмонолог, терапевт, педиатр, врач общей практики, ревматолог, фтизиатр, аллерголог, инфекционист, клинический миколог, онколог, паразитолог
Литература
Подписка на новости
Оставьте ваш E-mail и получайте новости, а также эксклюзивные предложения от лаборатории KDLmed
Памятка при выборе гистологического исследования от сети ветеринарных лабораторий «Шанс Био»
Приём гистологического материала в «ШАНС БИО»
С февраля наша лаборатория ввела новые требования к приёму гистологического материала, прежде всего это связанно и обоснованно с различными задачами по постановке диагноза и ведения онкопациента.
❶ Код 803 Гистологическое исследование (1 образец), включает одно заключение по материалу, помещаемому в гистологическую кассету. 30×25×6 мм – это максимальный размер того, что можно поместить в кассету и собственно размер самой гистологической кассеты.
Выглядит это следующим образом:
| Макро: | Микро: |
 |  |
Фото 1. ×4. ГЭ. Папиллома. Весь объем патологически изменённых тканей исследован. Границы удаления оценить легко.
| Макро: | Микро: |
 |  |
Фото 2. ×4. ГЭ. Мягкие ткани живота. Локализованное разрастание, предположительно аденома МЖ.
Ткани молочной железы в присланном материале не представлены.
Видна соединительно-тканная капсула.
❷ Код 814 Гистологическое исследование среднего операционного материала (1-2 фрагмента) включает одно и/или два заключения по материалу, в зависимости от случая и допобработку на два фрагмента исследуемой ткани.
Например: прислан крупный образец кожи, размером более 6 см с язвенным поражением поверхности. Отобрано два фрагмента тканей; поверхность и толща.
| Макро: | Макро: |
 |  |
Для выявления отдалённых фокусов неоплазии лаборант отдела патоморфологии производит полную ревизию образца тканей.
Фото 3. ×10. ГЭ. Ороговевающий
плоскоклеточный рак кожи, высокая степень
Слева книзу расположен фокус вертикального
роста или фокус инвазии.
Фото 4. ×40. ГЭ. Отдалённый метастатический фокус опухолевой ткани. Макроскопически, был расположен в 5 см от первоначального инфильтративно-язвенного поражения, обнаружен «случайно».
А ведь от этого зависит….
Клиническая классификация по стадиям (по системе TNM) информация приведена для данного случая неоплазии (ППК)
❸ Код 817 Гистологическое исследование большого операционного материала (2-3 фрагмента), включает одно и/или два и/или три заключения по материалу, в зависимости от случая и допобработку на несколько фрагментов исследуемых тканей.
При выборе данного кода можно направлять обширные области или даже целые органы и особо крупные фрагменты.
Напоминаем из анатомии…
Например: тело матки и оба яичника. Яичник, врастающий в сальник и рог матки. Яичник, сальник и лимфатический узел тазовой полости. Тело матки, шейка матки и лимфатический узел тазовой полости и т.д. в различных комбинациях.
Фото 5. Х 4. Окраска по Маллори. Матка. Концентрические разрастания лейомиосаркомы виде «глаз». Выраженный эндометриоз и кровенаполненные сосуды «дополняют» картину.
Например: гряда молочной железы. При этом происходит полная ревизия тканей, отбирается образец опухолевой ткани (первичный очаг), фокальный образец (вторичное разрастание) и лимфатический узел. Или же образец опухолевой ткани (первичный очаг) и оба лимфатических узла. При гистологическом исследовании РМЖ приоритет отдаётся в пользу регионарных лимфатических узлов (рекомендации ВОЗ).
Ревизия крупных разрастаний….
Поиск лимфатических узлов…..
Фото 6. Х 4. ГЭ. Лимфатический узел. Реактивные изменения (I88.9).
Фото 7. Х 4. Вторичный (метастатический) очаг опухолевой ткани (М-8211\6).
Фото 8. Х 10. ГЭ. Тубулярная аденокарцинома молочной железы, умеренно дифференцированная (М-8211\3 | G2).
Мы не принимаем материал, которые не соответствует требованиям лаборатории!
Несоответствие тары… и размеров. Бутылка с узким горлом….
«Утрамбованные» образцы «страдают» от отсутствия фиксирующей жидкости! Фактически исследуем некроз. «Тёмное месиво» чаще оказывается множеством фрагментов….
Код 803 используется для исследования образца тканей с верификацией патпроцесса, т.е. просто информирует врача о диагнозе пациента. И если размер неоплазии позволяет, то описываются границы резекции. Это происходит в случае своевременного обращения за профессиональной помощью владельцев, т.к. условно любая неоплазия изначально это одна клетка, которая начала патологически делиться, и в большинстве случаев размер соответствует требованиям лаборатории.
Кратко код 803 – DS + границы резекции при соблюдении размерности.
Код 814 используется для исследования образца тканей не соответствующего требованиям, (3×3×3 см.) и ориентирует врача на дальнейшее ведение онкобольного. Заключение одно или два в зависимости от конкретных тканей и патпроцесса.
Кратко код 814 – применяем, если визуально это орган и если размер явно больше чем 3×3×3 см; врачу нужен DS и границы.
Множество вопросов поступило по поводу семенников. Всё-таки это отдельный полноценный орган и для адекватного ведения больного необходима оценка придатка и/или соединительных тканей придатка или капсулы органа (при инвазии). Не всегда неоплазия расположена вблизи выводных каналов придатка, а размеры органа сильно вариабельны…. Иногда приходиться делать несколько образцов тканей.
Фото 9. ×10. ГЭ. Семенник и придаток. Строение в пределах нормы.
Кратко код 817 – применяем, если визуально это орган или обширная область, а врачу нужен не только DS, но и понимание патпроцесса. Границы, регионарные л.у. Может быть врач хочет проверить множественные очаги поражения для понимания стадийности заболевания при диссеминации мастоцитомы или лимфом кожи, посмотреть наличие инфильтративного роста в подлежащие и близлежащие структуры. Например, инвазия в кость при плоскоклеточном раке ногтевого ложа и т.д.
ДОПОЛНЕНИЕ:
❹ Код 805 Дополнительное окрашивание (3 красителя)., добавляется по желанию заказчика к 803 или эндоскопическому материалу (1 локализация, любой отдел) 882.
Фото 10. ×4. Окраска по Крейбергу. Эндоскопический материал. Назальный полип. Положительное окрашивание альциановым синим, при этом виден муцин, скапливающийся в виде «озёр».
Кратко: требуется для верификации диагноза при ряде случаев, включающих «сложные» неоплазии, аутоиммунные заболевания и дерматозы и т.д.
С Уважением, ветеринарный врач-патоморфолог лаборатории «ШАНС БИО»,
к.в.н. Заболотная Алена Михайловна