Что значит эмбрион ааа
Развитие эмбрионов
1 день. Оценка оплодотворения.
Спустя 16-18 часов после инсеминации (слияния полученных ооцитов и спермы) производится первая оценка оплодотворения. К этому времени эмбриолог видит сформировавшиеся пронуклеусы. На данном этапе происходит первая селекция – неоплодотворенные ооциты и аномальные зиготы изолируются от нормальных зигот.
Рис.1 Оплодотворенные яйцеклетки (пронуклеусы) – видны по два клеточных ядра.
2 день. Контроль развития эмбрионов.
Через 48 часов после получения ооцитов эмбриолог оценивает дробление эмбрионов, их морфологию (строение). Под морфологической оценкой понимают количество бластомеров (клеток) и аномалии цитоплазмы и ядра.
Идеальный эмбрион на 2 день должен иметь 4 равных по размеру одноядерных бластомеры без фрагментации.
Рис.2 Слева на картинке идеально сформированный эмбрион, состоящий из 4 бластомеров. Справа – строение нарушено, дальнейшее развитие прекратилось.
3 день. Контроль развития эмбрионов.
Через 72 часа после получения ооцитов производится оценка эмбрионов по следующим параметрам:
Количество бластомеров (клеток)- указывается цифра. В норме – 6-8 клеток.
На 3 день эмбриолог и лечащий врач могут принимать решение о сроке переноса эмбрионов. При переносе эмбрионов на 5 – день, на 3-й день все качественные эмбрионы переносятся в другую среду для культивирования до стадии бластоцисты.
Рис.3 Слева эмбрион отличного качества – оценка 8; Эмбрион по центру имеет небольшую фрагментацию – оценка 6 Sl Fr; Справа эмбрион сильно фрагментирован, подсчет бластомеров затруднен.
4 день. Дальнейшее культивирование эмбрионов.
К 4 дню процесс компактизации должен быть завершен, и эмбрион достигает стадии морулы.
Рис 4. Две отлично сформированные морулы.
5 день. Культивирование эмбрионов и перенос.
К этому времени эмбрион должен развиться до стадии бластоцисты. На основании морфологических признаков делается оценка возможности бластоцисты к дальнейшему развитию и принимается решение о ее пригодности к переносу в полость матки или витрификации (заморозке). Бластоцисты имеют цифровую и буквенную оценки.
Оценка степени развития бластоцисты и статуса хэтчинга (вылупления из оболочки):
1 – ранняя бластоциста: бластоцель меньше половины объема эмбриона (eBl);
2- бластоциста: бластоцель больше половины объема эмбриона (Bl 2);
3- полная бластоциста: бластоцель полностью заполняет эмбрион (Bl 3)$
4- экпандированная бластоциста: бластоцель полностью заполняет эмбрион, истончение зоны внешней оболочки (Bl 4 и Bl 5)
5- вылупляющаяся бластоциста: трофэктодерма начинает выступать их зоны вншней оболочки (Bl 5);
Оценка внутренне клеточной массы:
А – много плотно упакованных клеток;
B – несколько свободно сгруппированных клеток;
C – мало клеток, клетки плохо сгруппированы.
Оценка трофэктодермы:
А – много клеток, формирующих связанный эпителий;
В — несколько клеток, формирующих свободный эпителий;
C — несколько клеток серповидной формы.
Таким образом, эмбрион получает тройную оценку: BL 5АА
Оценка качества яйцеклеток и эмбрионов при ЭКО
Качество яйцеклеток и качество эмбрионов при ЭКО играет очень важную роль, значительно влияя на успешность применения этой репродуктивной технологии.
От качества взятых женских и мужских половых клеток и от того, как произошло оплодотворение, во многом зависит, будет ли попытка ЭКО неудачной или же наступит долгожданная беременность, которая приведет к рождению здорового ребенка. Поэтому технология экстракорпорального оплодотворения предусматривает оценку качества эмбрионов и яйцеклеток.
Как же определить качество яйцеклетки, и как проводится оценка качества эмбрионов?
Оценка качества яйцеклетки
Для успешного оплодотворения нужны зрелые яйцеклетки, которые будут способны взаимодействовать со сперматозоидом. Как правило, у молодых женщин достаточно хорошее качество ооцитов. Однако после 35 лет оно заметно ухудшается. Специальная гормональная стимуляция, проводящаяся перед забором яйцеклеток, позволяет ускорить их созревание. Однако даже после стимуляции ооциты могут оставаться недостаточно зрелыми и качественными.
Как проверить качество яйцеклетки?
Оценка ооцита проводится сразу после их забора из яичников женщины. При этом проверка качества яйцеклетки представляет собой визуальное наблюдение, которое осуществляется с помощью бинокулярного микроскопа.
Качество ооцитов определяется по внешнему виду цитоплазмы, вителлинового слоя, полярного тельца. При хорошем качестве — цитоплазма должна быть однородной, одного цвета и с отсутствием гранул. О плохом качестве яйцеклетки говорит присутствие вакуолей, темная окраска, гранулы, деформации.
Проверка качества яйцеклетки позволяет провести отбраковку наиболее некачественных экземпляров и тем самым выбрать наиболее подходящий для процедуры ЭКО генетический материал. Зрелый ооцит обозначают аббревиатурой MII.
Кроме того необходимо проверить качество спермы мужчины и на основе полученных результатов определить способ оплодотворения с применением технологии ЭКО или ИКСИ. Оба репродуктивных метода представляет собой оплодотворение «в пробирке», но в первом случае сперматозоиды должны самостоятельно оплодотворять яйцеклетки, а во втором — сперматозоид искусственно вводится в яйцеклетку.
Проверка качества эмбрионов в первые дни после оплодотворения
Качество эмбрионов впервые определяют через 18-20 часов после процедуры оплодотворения. В это время эмбриолог может сделать выводы, произошло ли нормальное оплодотворение, и образовалась ли зигота. Он определяет, присутствуют ли 2 пронуклеуса, оценивает их качество, симметричность, внешний вид.
На вторые сутки происходит дробление зиготы — появляются дочерние клетки — бластомеры. Качество бластомеров на этом этапе определяется по размерам, форме, также определяется степень фрагментации.
Если внутри эмбриона много бластомеров и низкая степень фрагментации (объем безъядерных элементов цитолазмы), то эмбрион считается качественным.
В эмбрионологии используется специальная классификация качества эмбрионов:
Также в этой классификации присутствуют цифры, указывающие на количество бластомеров. Чем больше цифра, тем лучше эмбрион.
На третий день в эмбрионе уже от 7 до 9 бластомеров. В этот период могут возникать «генетические поломки», приводящие к остановке развития эмбриона.
На четвертый день в зародыше уже присутствует 10-16 бластомеров.
На пятый день эмбрион переходит в стадию бластоциста.
Качество эмбрионов на стадии бластоцисты
На стадии бластоцисты у эмбриона уже появляется полость, которая достигает 50% от общего объема, и есть два типа клеток, которые образуют наружный и внутренний слои. Качество бластоцист определить очень важно, потому что именно на этой стадии происходит подсадка эмбриона в полость матки женщины.
На этой стадии эмбрион окружен оболочкой. После перемещения в матку эта оболочка разрывается и у бластоцисты появляется возможность прикрепиться к стенке матки.
Качество бластоцист определяется несколькими критериями: размер внутренней полости и степень проникновения эмбриона за оболочку, количество клеток и их плотность, состояние наружного слоя.
Размер внутренней полости определяет степень зрелости бластоцисты:
1 — если полость внутри эмбриона менее 50% от его объема (ранняя бластоциста);
2 — полость внутри эмбриона больше 50%;
3 — полость занимает весь объем эмбриона;
4 — полость увеличивается, а оболочка эмбриона становится тоньше;
5 — наружный слой бластоцисты проникает сквозь блестящую оболочку;
6 — бластоциста покидает оболочку.
Количество клеток и их плотность:
А — много плотно расположенных клеток.
В — среднее количество клеток внутри бластоцисты.
С — клеток внутри бластоцисты мало.
Состояние наружного слоя:
А — много клеток;
В — среднее количество клеток.
С — мало клеток.
Согласно этой классификации качество эмбрионов 4АА будет лучше, чем качество эмбрионов 2ВВ.
Бластоцисты 3АА, 4АА, 5АА, 6АА относят к эмбрионам хорошего качества. Бластоцисты 1АВ, 2ВВ и т.д. — среднего качества. Бластоцисты, в аббревиатуре которых есть «С» — плохое качество.
Чем выше будет качество эмбрионов при подсадке в матку, тем больше шансов будет, что процедура ЭКО окажется успешной.
Обычно во время процедуры выбирается 1 или 2 наивысшего качества эмбриона при подсадке в матку. Если было получено больше качественных эмбрионов, то «лишние» экземпляры замораживаются. Они могут быть использованы позже, если данный перенос не завершиться беременностью. При замораживании эмбрионов используется специальный метод быстрой заморозки, что позволяет сохранить их жизнеспособность.
Как оценивают и выбирают лучший эмбрион
Все эмбрионы, словно бриллианты в руках эмбриолога «ювелира», оцениваются с момента оплодотворения.
Классификация по Дэвиду Гарднеру
Существует множество систем, при классификации по д-ру Дэвиду Гарднеру в обозначении указывают.
Цифра (от 1 до 6) — она обозначает степень развития эмбриона:
1 — полость бластоцисты меньше, чем половина эмбриона
2 — полость бластоцисты больше, чем половина эмбриона
3 — полная бластоциста, полость заполняет почти весь эмбрион
4 — развитая бластоциста, полость включает весь эмбрион, тонкая оболочка
5 — бластоциста «вылупляется» из оболочки
6 — бластоциста без оболочки
Первая буква (А, B, C), означающую качество зародыша (эмбриобласт):
A — много клеток, плотно упакованные
B — несколько клеток, свободно сгруппированные
C — очень немного клеток
Вторая буква (А, B, C), которая обозначает качество трофобласта:
A — много клеток, образуют единый слой
B — мало клеток, образуют свободный эпителий
C — очень мало крупных клеток
Как и бриллиант, идеальным считается эмбрион с оценкой AA.
Однако, эмбрион сложнее прекрасного камня, только методы ПГТ позволяют выбрать на перенос наиболее жизнеспособные эмбрионы, без возможных генетических аномалий, что значительно повышает вероятность имплантации и рождения ребенка уже в результате первой попытки.
Решение о проведении ПГТ принимается пациентами после комплексной консультации акушера-гинеколога, репродуктолога, эмбриолога, уролога-андролога и генетика.
На практике самый популярный вид генетических тестов для эмбрионов ПГТ-А (на отсутствие хромосомных проблем) необходимо делать в 95% случаев.
Этапы ЭКО: оценка качества эмбрионов
Результаты экстракорпорального оплодотворения зависят от огромного количества факторов, но именно эмбриологический этап процедуры имеет важнейшее, практически определяющее результат, значение.
В предыдущих публикациях мы говорили о том, на какие этапы делится ЭКО и рассказали о двух из них – стимуляции контролируемой суперовуляции и трансвагинальной пункции фолликулов яичников. На этот раз речь пойдет о важнейшем этапе развития и селекции эмбрионов.
На следующие сутки после проведения трансвагинальной пункции фолликулов яичников и оплодотворения яйцеклеток (ооцитов) эмбриолог извлекает чашки и внимательно осматривает яйцеклетки – ищет так называемые пронуклеусы.
Для Homo Sapiens – это 23 хромосомы, включая одну половую. И сперматозоид, и яйцеклетка несут именно по половинчатому набору хромосом. При оплодотворении же происходит их объединение и получается исходный объём генетической информации – 46 хромосом, включая 2 половые.
Яйцеклетка всегда несёт X половую хромосому. Сперматозоид же может нести как Х хромосому, так и Y половую хромосому. При объединении двух X хромосом будущий ребёнок получает женский пол, а при объединении X и Y половых хромосом – мужской.
Соответственно, в ооците на первые сутки после оплодотворения, должно появиться 2 пронуклеоса (1 материнский и 1 отцовский). Но бывает это далеко не всегда, причем независимо от метода оплодотворения. Эмбриолог может находить оба пронуклеоса, только один, больше двух, или ни одного.
Два пронуклеоса – оплодотворение произошло, 0 или 1 пронуклеос – с большей вероятностью нет. Если обнаруживается более 2 пронуклеосов – оплодотворение произошло, но неправильно (возможно яйцеклетка первоначально имела не один набор хромосом, а два, возможно, что два «набора» было в сперматозоиде; кроме того, не исключено, что 2 сперматозоида оплодотворили одну яйцеклетку).
Разберём эти случаи. Два пронуклеоса эмбриолог может не увидеть в первые сутки. Рационально пересмотреть не оплодотворившиеся ооциты на 2-е или 3-и сутки. Нередко бывает, что яйцеклетки, не оплодотворившиеся по данным первого осмотра, демонстрируют признаки оплодотворения или уже дробления (увеличение количества клеток у развивающегося эмбриона) при повторном осмотре на 2-е или 3-и сутки после проведения трансвагинальной пункции фолликулов яичников. Эмбрионы же, имеющие 1 или более 2 пронуклеусов могут в дальнейшем развиваться, а могут и нет. Идеальный вариант – наличие в ооците двух пронуклеусов на первые сутки после проведения пункции.
Дальше идет дробление. Эмбриолог за время дробления смотрит эмбрионы дважды: на третьи и на пятые сутки после проведения пункции. В ряде случаев эмбрионы пересматриваются ещё и на вторые и/или шестые сутки.
Как же должны выглядеть эмбрионы на всех этих этапах своего развития? Сначала придётся ввести понятие о классах эмбрионов в зависимости от степени фрагментации, иначе дальше будет сложно.
В порядке увеличения уровня фрагментации: класс А – класс В – класс С – класс D. Эмбрионы с «хорошим» уровнем фрагментации – А и В. На 2-е сутки развития эмбрион, в идеале, состоит из 4 клеток, но количество клеток может варьировать от 2 до 6. 3-и сутки – от 6 до 12 клеток (бластомеров), чаще всего 8. 4-е сутки – от 10 клеток и более.
Эмбрионы, имеющие количество клеток более 10, начинают процесс так называемой «компактизации» – уплотнения бластомеров эмбриона и уменьшение пространства между клетками. Такие эмбрионы называются морулами, и они делятся на классы с 1 по 4 (G1/G2/G3/G4). Самыми «симпатичными» являются G1, а наименее перспективными – G4. И на 5-е сутки развития эмбрион может оставаться морулой. Несмотря на факт отставания в развитии, перенос таких эмбрионов может приводить к наступлению беременности, заканчивающейся рождением здорового ребёнка. Это относится к морулам G1 и G2.
На 5-е сутки эмбрионы состоят уже из более чем 32 клеток (бластомеров) и называются бластоцистами. Они так же делятся на классы от Б1 до Б6. И здесь, в отличие от морул, чем выше класс, тем перспективнее эмбрион. Следом за «цифрой класса» идёт двухбуквенное обозначение. Две заглавных буквы от А до С показывают, в сущности, тоже, что и аналогичные буквенные обозначения у дробящихся эмбрионов 2-3 суток развития. Только одна буква обозначает внутренний слой клеток, а вторая – внешнюю клеточную массу.
Как же выглядят перспективные эмбрионы 5 суток? Есть такое понятие как «эмбрионы хорошего качества» и для 5-х суток развития к ним относятся бластоцисты, начиная с класса Б3ВВ. Значит ли, что остальные эмбрионы бесперспективны? Нет, и морула G1 и бластоциста Б3СС могут приводить к наступлению беременности, и на них не всегда стоит ставить крест. Просто такие случаи относительно редки и эти эмбрионы менее перспективны, нежели тот же Б3ВВ или Б4АВ.
А вот перенос морулы G3 или бластоцисты, имеющей одну или две буквы D в обозначении (Б2СD, Б5DD), вряд ли приведёт к наступлению долгожданной беременности, и от переноса таких эмбрионов рационально воздержаться.
Автор статьи Бендусов Иван Алексеевич, заведующий отделением ЭКО
Путь от зиготы к бластоцисте
Образование зиготы – это результат слияния генетического материала сперматозоида и яйцеклетки, которое происходит в результате одного из методов лечения бесплодия – ЭКО или ИКСИ. Именно этот начальный клеточный цикл продолжается максимально долго – почти сутки. Итогом становится получение в процессе искусственного оплодотворения двух одинаковых клеток – бластомеров.
Они характеризуются круглой формой, идентичной структурой, потенциалом развития и биохимией. У бластоцист существует одна очень значимая функция – тотипотентность, что означает возможность создавать различные живые клетки. Следует учесть, что на этапе 8 бластомеров эта функция исчезает. В дальнейшем бластомеры приобретают другое свойство – специализацию. Этим объясняется тот факт, что любое травмирование эмбриона, полученное на стадии 8 бластомеров, без труда пропадает. Как правило, в эти же сроки эмбрион может разделиться на 2-3 части, в результате чего развиваются однояйцевые близнецы.
Дробление эмбрионов осуществляется и в дальнейшем, клетки внешней оболочки морулы превращаются в эпителий, активно способствуя наполнению межклеточного пространства ионами и водой. В итоге внутри образуется особая полость, которая называется бластоцелью. И с этого момента эмбрион, полученный в результате ЭКО или ИКСИ, обретает новое обозначение – бластоциста или бластула.
Качество эмбрионов, полученных при экстракорпоральном оплодотворении
— максимальная скорость дробления;
— отсутствие фрагментов без ядер;
— бластомеры идеальной формы;
— отличная способность к имплантации в процессе ЭКО.
На картинке:
1)двухклеточный эмбрион 1-го класса;
2) четырёххклеточный эмбрион 1-го класса;
3) пятиклеточный эмбрион 1-го класса;
4)восьмиклеточный эмбрион 1-го класса;
5)двенадцатиклеточный эмбрион 1-го класса.
— бластомеры, полученные в результате оплодотворения яйцеклетки, неровной формы, либо присутствие фрагментов цитоплазмы также неровной формы, при их количестве не более 10% от общего объёма;
— отличная способность к имплантации.
1)двухклеточный эмбрион 2-го класса;
2) пятиклеточный эмбрион 2-го класса;
3) четырёххклеточный эмбрион 2-го класса;
4)восьмиклеточный эмбрион 2-го класса.
класс 3 (С) – удовлетворительно
— фрагментация, составляющая от 10 до 50% от общего объёма
1) шестиклеточный эмбрион 3-го класса;
2) восьмиклеточный эмбрион 3-го класса.
— фрагментация, составляющая более 50% от общего объёма
Стадии развития эмбриона и скорость их роста
1)нормальное оплодотворение яйцеклетки;
2)патологическое оплодотворение яйцеклетки.
Проще всего осуществить выбор эмбрионов на вторые сутки после пункции, выполненной в процессе программы ЭКО. К этому моменту явно видно, какие эмбрионы замедляются в развитии, а какие и вовсе его прекращают.
5-е сутки
Бластоциста (16 бластомеров и более);
Бластоциста покидает zona pellucida, далее наступает очередь естественного хэтчинга.
К этому времени поверхность максимально растягивается, и, соответственно становится очень тонкой. Образуется небольшое отверстие, через которое бластоциста и выходит за пределы zona pellucida. Наступает новая стадия – стадия имплантации бластоцисты. (см фото ниже).
Благодаря тому, что эмбрион можно культивировать до стадии бластоцисты, у эмбриологов, работающих в центре по лечению бесплодия, расширяются возможности для выбора наиболее качественных экземпляров. К тому же и сам процесс перемещения эмбриона в матку в процессе экстракорпорального оплодотворения становится более физиологичным, что благоприятно сказывается на результате имплантации, и, соответственно, на успехе ЭКО.
Выбор оптимального момента для подсадки эмбриона
Как правило, в клиниках по лечению бесплодия практикуется подсадка эмбриона на вторые или третьи сутки после культивирования. На практике не было выявлено существенного влияния на результат беременности при переносе на вторые или на третьи сутки. Момент выбирают, исходя из анализа интенсивности, а также равномерности дробления эмбрионов. В случае, если на вторые сутки выбор сделать не получается – подсадка выполняется на следующий день.
Пациентке советуют предварительно позвонить в центр по лечению бесплодия и уточнить, как происходит оплодотворение яйцеклетки. Врач сообщает, когда ей следует подойти для процедуры переноса эмбрионов в матку.
Оптимальное количество эмбрионов, рекомендуемое для переноса
Как показывает практика, при экстракорпоральном оплодотворении лучше всего переносить в полость матки максимум два эмбриона, при условии, что оба отличаются высоким качеством. Если же качество эмбрионов вызывает сомнения, возможна пересадка трёх эмбрионов.
Некоторые центры по лечению бесплодия практикуют в процессе ЭКО перенос четырёх, и даже пяти эмбрионов. Окончательное решение в этом случае за эмбриологом. Но в последнее время всё больше известных специалистов – как отечественных, так и зарубежных – рекомендуют не подсаживать более 3-х эмбрионов. Ведь, как правило, чаще всего все эмбрионы или приживаются, или погибают.
Подсадка в полость матки большого количества эмбрионов резко увеличивает риск развития в процессе экстракорпорального оплодотворения многоплодной беременности. Поэтому постарайтесь обсудить этот вопрос с вашим доктором.